操作步骤(仅供参考)： 
1、配制 TY 培养基：
①称取本品8g于990mL蒸馏水或去离子水中,加热溶解,121℃高压灭菌15分钟,冷却至55度后，加入10ml 高压灭菌的1mol/L氯化钙溶液，混匀后，倾注培养皿分装。
②如果需要 TY 琼脂培养基 ，可在第①步溶解 TY 培养基(粉剂)后加入 15g 琼脂粉 ，加热 溶解后再高压灭菌处理。
2、发根农杆菌甘油菌培养：
①取出甘油菌置于冰上 ，并置于超净台内 ，后续操作都在超净台内操作。
②把镊子的顶端在 70%酒精中蘸一下 ，并且在酒精灯上略略烧一下 ，使镊子的顶端处于 无菌状态。
③用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙 签放到含有 50μg/ml 链霉素  的 TY 液体培养基的试管内或细菌培养瓶内 ，28~30ºC ， 约 200rpm 培养至少 24h。
3、农杆菌感受态细胞的培养：
①取-70°C 保存的农杆菌感受态于室温或冰水浴片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时 插入冰浴中。
②每 100μl 感受态加 1μg 质粒DNA ，用手拨打管底混匀 ，依次于冰上静置 5 分钟、液氮5分钟、 37°C 水浴 5 分钟、冰浴5分钟。
③加入 800μl TY 液体培养基 ，于 28°C 振荡培养 2~3 小时。
④5000rpm 离心 1min 收菌 ，留取 100μl 左右上清 ，轻轻吹打重悬菌块 ，涂布于含相应 抗生素的 TY 平板上 ，倒置放于 28°C 培养箱培养 2~3 天。